倉鼠ELISA試劑盒實驗標(biāo)準(zhǔn)曲線的技術(shù)解答內(nèi)容
在倉鼠ELISA試劑盒實驗中比較常用的一種分析方法。標(biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會直接影響到實驗的結(jié)果,甚至是關(guān)系到實驗的成敗。那么在倉鼠ELISA試劑盒實驗中,這一方面該如何處理呢?標(biāo)準(zhǔn)曲線法也稱為外標(biāo)法或直接比較法,是一種簡便、快速的定量方法,
1.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi),包括上限和下限。而對于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度*陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。
2.倉鼠ELISA試劑盒采用倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度,這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。
3.樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出來的,所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結(jié)果無從談起。
4.做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎?,但一般來說,相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98,對于有些實驗,至少要0.99甚至是0.999。
5.倉鼠ELISA試劑盒檢測標(biāo)準(zhǔn)樣品時,應(yīng)按濃度遞增順序進行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準(zhǔn)確性。
6.標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個點,但至少要保證有5個點。
標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度得到后,可通過計算器、Excell或SPSS統(tǒng)計軟件進行繪制,并得到相關(guān)的回歸方程(即計算公式)和相關(guān)系數(shù)(回歸系數(shù))。