上海研域ELISA試劑盒的操作流程
2023-07-12
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ELISA試劑盒原理
本試劑盒系由預包被豬瘟病毒重組E2蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬瘟病毒抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有豬瘟病毒抗體,則將與酶標板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶反應形成藍色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應后,產(chǎn)物變?yōu)?;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬瘟病毒抗體。
ELISA試劑盒操作流程:
1.進入試劑準備區(qū),開啟冰箱冷凍層取出HBV- DNA檢測試劑盒。查看外包裝盒(包括生產(chǎn)批號、有效期),無誤后拆開試劑盒,取出核酸提取液、反應液及Taq酶(核對核酸提取液、HBVPCR 反應液及Taq酶管上批號與試劑外包裝盒批號是否一-致) 不一致則不可使用,需更換新的試劑。室溫平衡20min,融化后2000rpm離心備用。
2、核酸提取液的分裝
(1)取0.5ml離心管架置于超凈工作臺內(nèi)(開機前用紫外線消毒30分鐘),用右手拿起鑷子逐個將離心管放入離心管架( 注意應夾住離心管外壁,不能碰到管內(nèi)壁),擺放順序為橫列從左往右擺。