細(xì)胞ERK1/2激酶總活性光度法定量檢測試劑盒的用途和注意事項(xiàng)

主要用途

 細(xì)胞ERK1/2激酶總活性光度法定量檢測試劑是一種旨在通過多肽底物，在ERK1/2激酶敏感性抑制劑存在與否的情況下，受到ERK1/2激酶磷酸化后，進(jìn)而由丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng)，測定產(chǎn)生ADP過程中，伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的氧化反應(yīng)， 即采用光度法測定其氧化后吸光峰值的變化，以分析細(xì)胞裂解樣品中ERK1/2激酶總活性而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解萃取液樣品（動(dòng)物、人體）、部分或*純化酶樣品中ERK1/2激酶的定量檢測，以及抑制劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，高度敏感。

注意事項(xiàng)

1． 本產(chǎn)品為20次操作

2． 操作時(shí)，須戴手套

3． 系統(tǒng)操作過程中，背景測定只需1次

4． 樣品處理忌用磷酸緩沖溶液 

5． 樣品須澄清，至關(guān)重要 

6． 加入樣品啟動(dòng)反應(yīng)后3秒內(nèi)即刻光度測定

7． 建議使用比色皿測定

8． 測定值由高到低變化；測定可持續(xù)30分鐘

9． 光度測定后，比色皿須清洗*

10． 樣本測定0分鐘讀數(shù)高于5分鐘讀數(shù)表明具有酶活性

11． 樣本測定讀數(shù)持續(xù)上升，表明酶活過低或樣品量過低

12． 非特異活性高于總活性，表明特異性酶活過低或樣品量過低

13． 建議待測樣本蛋白濃度為100微克/10微升（本公司提供  Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒－GMS30030.1） 

14． 如果待測樣品濃度過高或過低，可以調(diào)整樣品濃度

15． ERK激酶活性單位濃度定義：在30℃溫度下，pH 7.5條件下，每分鐘內(nèi)能夠氧化1微摩爾還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）所需的酶量作為一個(gè)活性單位

16． 本公司提供系列蛋白激酶檢測試劑產(chǎn)品