一文帶你了解豚鼠elisa試劑盒的使用方法!
2021-12-13
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豚鼠elisa試劑盒利用雙抗體夾心法鑒定小鼠淋巴細(xì)胞雜交瘤培養(yǎng)上清中單克隆抗體或特異親和純化的單克隆抗體的類(lèi)和亞類(lèi)。采用小鼠抗體共有位點(diǎn)的二抗包被微孔板,與加入的培養(yǎng)上清中的小鼠抗體結(jié)合,再加入HRP標(biāo)記的抗小鼠各類(lèi)、亞類(lèi)的抗體來(lái)分別反應(yīng),后用TMB底物系統(tǒng)顯色并用稀硫酸終止,再通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度來(lái)判斷被測(cè)單克隆抗體的類(lèi)或亞類(lèi)。亦可通過(guò)肉眼觀察顏色深淺直接判斷結(jié)果。
豚鼠elisa試劑盒的使用方法:
1、將elisa試劑盒各組分恢復(fù)室溫,同時(shí)用純水將洗滌液配成工作液洗滌液配成工作液。
2、取出酶標(biāo)板;扣取適量酶標(biāo)板條。多余的用自封袋保存,記得放入干燥劑。
3、將標(biāo)本檢測(cè)孔每孔先加入標(biāo)本稀釋液。然后將細(xì)胞培養(yǎng)上清(或特異親和純化的抗體)再加入酶標(biāo)微孔板,陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照孔不加標(biāo)本稀釋液,貼上封板膜溫育。
4、反應(yīng)完畢后棄去板內(nèi)液體,在不掉纖維的吸水材料上拍干或機(jī)洗。再在每個(gè)標(biāo)本的孔中分別加入酶標(biāo)二抗,通用陽(yáng)性、陰性對(duì)照的各孔也一樣。在加樣圖上或酶標(biāo)板上做好標(biāo)記。貼上封板膜溫育
5、吸棄板內(nèi)液體,洗板后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機(jī)洗。每孔分別加入單組份TMB底物液,封板膜貼板避光顯色。
豚鼠elisa試劑盒特異性好,可肉眼觀察顯色結(jié)果,確定顯色孔所對(duì)應(yīng)的酶標(biāo)二抗判斷此標(biāo)本的Ig類(lèi)或亞類(lèi)。也可將反應(yīng)終止液終止反應(yīng)后用酶標(biāo)儀測(cè)定波長(zhǎng),參考波長(zhǎng)雙波長(zhǎng)測(cè)定結(jié)果,參看高值孔所對(duì)應(yīng)的酶標(biāo)二抗判定此標(biāo)本的Ig類(lèi)或亞類(lèi)。