做優(yōu)化ELISA試劑盒加樣應(yīng)留心哪些步驟
ELISA試劑盒加樣的優(yōu)化:在這一進(jìn)程中,一般情況下有三次加樣,它們分別是加標(biāo)本,加酶物,加底物。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)部分濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,防止氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上劇烈振動(dòng)。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只需待血清天然凝集、縮短后即可獲得。也可在板孔中參與稀釋液,再在其參與血清標(biāo)本,然后在微型顫動(dòng)器上顫動(dòng)1分鐘以確?;旌?。一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,跨過(guò)一星期測(cè)定的需低溫冰存。
ELISA試劑盒常見(jiàn)液體樣本處理方法
1、血清:用無(wú)菌管搜集,室溫血液自然凝固10-20分鐘,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)堆積,應(yīng)再次離心。
2、尿液:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
3、血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)該再次離心。
4、胸腹水:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
5、腦脊液:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
6、唾液:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
7、細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管搜集。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
8、牛奶:用無(wú)菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。