Elisa試劑盒怎么選擇得心應(yīng)手的
ELISA試劑盒在試驗(yàn)室已經(jīng)相當(dāng)遍及,絕大多數(shù)ELISA試劑盒都是用于檢測(cè)未知樣本中抗原的濃度。用試劑盒當(dāng)然比自己漸漸摸條件快得多,ELISA試劑盒不只可以讓試驗(yàn)更便當(dāng),往往還更加?,F(xiàn)在市面上的ELISA試劑盒既有國(guó)產(chǎn)也有進(jìn)口,數(shù)量繁復(fù)令人目不暇接,怎樣才能選出zui適用的產(chǎn)品呢,首先當(dāng)然得根據(jù)我們所要檢測(cè)的分子進(jìn)行檢測(cè),除此以外也還有一些需求加以考量的要素。
步、清晰檢測(cè)何種蛋白。
第二步、清晰編碼該蛋白的基因與其它哪些物種同源性。
第三步、尋找檢測(cè)這些物種蛋白的試劑盒。
第四步、咨詢商家ELISA是試劑盒運(yùn)用的抗體類型:多抗還是單抗,單抗是針對(duì)什么抗原決定簇的。
第五步、做出自己的判別該買哪個(gè)試劑盒。
從Elisa試劑盒的靈敏度、特異性、精密度、準(zhǔn)確度、簡(jiǎn)便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面點(diǎn)評(píng):
靈敏度:①為試劑檢出被檢物質(zhì)的zui低量的才能; ②為試劑對(duì)大量樣品中陽(yáng)性檢出的才能;
特異性:常用穿插反響率表明。含有與待測(cè)物附近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)或許存在穿插反響,使測(cè)定成果升高,或許導(dǎo)致假陽(yáng)性,所以穿插反響是點(diǎn)評(píng)其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo);
精密度:ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時(shí)調(diào)查線性范圍;
準(zhǔn)確度:經(jīng)過添加回收試驗(yàn)進(jìn)行點(diǎn)評(píng);
簡(jiǎn)便性:指在不影響試劑的前三項(xiàng)指標(biāo)的前題下,試驗(yàn)和測(cè)定步驟越少越好,在定性試驗(yàn)中成果判別簡(jiǎn)略明了,定量試驗(yàn)成果計(jì)算也應(yīng)簡(jiǎn)略;
安全性:指試劑對(duì)操作者和環(huán)境安全無(wú)害無(wú)傳染性;
經(jīng)濟(jì)性:試劑在同等質(zhì)量條件下經(jīng)過大規(guī)模出產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本,而市場(chǎng)價(jià)格比較合理;
試劑點(diǎn)評(píng):需求有的確證辦法和確證的樣品進(jìn)行檢測(cè)。
根據(jù)試驗(yàn)類型、抗體類型、穿插反響、檢測(cè)方式來(lái)選擇Elisa試劑盒:
一般人們運(yùn)用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA試驗(yàn),雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測(cè)抗體之間,這種辦法既靈敏又有效,受到了許多研究者的喜愛。不過有時(shí)候雙抗夾心法并不是*選擇,例如有時(shí)候抗原特別小讓兩個(gè)大抗體難以附著,又或者抗體只要一個(gè)抗體結(jié)合位點(diǎn)。在上述情況下,競(jìng)賽性ELISA就更為適用,這種辦法是采用帶符號(hào)的純化抗原與樣本中無(wú)符號(hào)的抗原進(jìn)行競(jìng)賽,以結(jié)合捕獲抗體。