ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果為什么不是我想要的?
絕大多數(shù)ELISA試驗(yàn)人員zui頭疼的問題,莫過于試驗(yàn)成果不理想。其實(shí)做科研試驗(yàn),就是這樣在不斷探究中尋求真理。很難有人可以的試驗(yàn)成功。但是,我們?cè)谧鲈囼?yàn)過程中可以盡量防止哪些常犯的過錯(cuò)呢?
今日讓我們一起來看一下,影響ELISA試驗(yàn)成果不理想的原因有哪些?
1. 操作前應(yīng)對(duì)試驗(yàn)的物理參數(shù)有充沛的了解,如環(huán)境溫度(保持在18 c~25℃)、反響孵育溫度和孵育時(shí)刻、洗刷的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。
2. 正確運(yùn)用加樣器加樣器應(yīng)筆直加入標(biāo)本或試劑,防止刮擦包被板底部。加樣過程中防止液體外濺,血清殘留在反響孔壁上,加樣器吸頭要清洗潔凈,防止污染,加樣次第要與說明書共同,否則可導(dǎo)致成果過錯(cuò),試驗(yàn)重復(fù)性差。
3. 手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,洗刷次數(shù)不要超越說明書引薦的洗刷次數(shù),洗液在反響孑l內(nèi)滯留的時(shí)刻不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孑l間竄流,形成孔問污染,導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性。
4. 要保證加液量共同 咱們?cè)谶\(yùn)用時(shí)感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量禁絕,形成顯色不一致,判斷過錯(cuò)。
5. 顯色液量不行過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下,加顯色系統(tǒng)后要避光反響,顯色液量不能過多,以免顯色過強(qiáng)。ELISA試劑盒的影響因素應(yīng)選用有國(guó)家批準(zhǔn)文號(hào),質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品,不能圖便宜,忽視質(zhì)量保證。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi),在運(yùn)用時(shí)先平衡至室溫,不同批號(hào)的試劑組分不宜穿插運(yùn)用。試劑開啟后要在一周內(nèi)用完,剩余的試劑下次用時(shí)應(yīng)先查看是否變質(zhì),顯色劑如被污染變色將形成悉數(shù)顯色,導(dǎo)致過錯(cuò)成果。
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