豬ELISA試劑盒試驗注意事項有哪些?
一年有四個時節(jié),每個時節(jié)都有不同的風光,而我喜歡冬天下雪時的艷麗風光。冬天,大雪紛飛人們好象來到了一個幽雅安靜的jing界,來到了一個晶瑩透剔的童話般的世界。松的那清 香,白雪的那冰香,給人一種涼瑩瑩的勸慰。一切都在過濾,一切都在前進,連我的心靈也在凈化,變得純真而又夸姣。
在ELISA實驗前的留神事項
1、仔細閱讀說明書
2、斷定試劑盒在有效期內(nèi)
3、按說明書斷定一切試劑*(數(shù)量、體積)
4、標本制備要標準,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者,留神低溫保存
5、準備好一切實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等
6、根據(jù)檢測標本數(shù)量斷定所需試劑的量
7、按說明書將所用試劑平衡至室溫,制造所需試劑
ELISA實驗時,留神事項如下:
1.正式實驗時,應分別以陽性對照與陰性對照操控實驗條件,待檢樣品應作一式二份,以確保實驗效果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可選用羊血清、兔血清或BSA等關閉。 2.在ELISA中,進行各項實驗條件的挑選是很重要的,其間包含:
(1)固相載體的挑選:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其方式可所以凹孔平板、試管、珠粒等?,F(xiàn)在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載 體,在運用前均可進行挑選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,查詢其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附功用是否出色。
(2)包被抗體(或抗原)的挑選:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時刻及其蛋白量也有必定影響,一般多選用4℃18 ~24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它實驗條件相一起,查詢陽性標本的OD值。挑選OD值大而蛋白量少的 濃度。關于大都蛋白質(zhì)來說一般為1~10μg/ml。
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