牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用及產(chǎn)生的常見問題(1)
現(xiàn)代生物技術(shù)包括基因工程、細(xì)胞工程、酶工程和發(fā)酵工程,這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切的關(guān)系,特別是在生物醫(yī)藥領(lǐng)域,細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產(chǎn)過程中很多都是通過細(xì)胞培養(yǎng)來實(shí)現(xiàn)的,基因工程乙肝疫苗大多是以CHO細(xì)胞作為載體;基因工程抗體藥物的制備也離不開細(xì)胞培養(yǎng)。細(xì)胞工程領(lǐng)域更離不開細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),雜交瘤單克隆抗體的研究制備*是通過細(xì)胞培養(yǎng)來實(shí)現(xiàn)的,發(fā)酵工程和酶工程有的也與細(xì)胞培養(yǎng)密切相關(guān)。總之,細(xì)胞培養(yǎng)在整個(gè)生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展中起到了很關(guān)鍵的核心作用。細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展,培養(yǎng)基的質(zhì)量是關(guān)鍵,而培養(yǎng)基的構(gòu)成中動(dòng)物血清對細(xì)胞的生長繁殖起著重要作用。在動(dòng)物血清中牛血清的應(yīng)用又是zui廣泛的,所以牛血清的質(zhì)量直接影響生物制品的質(zhì)量和安全性。
一、牛血清的主要成分
牛血清是一種成分復(fù)雜的混合物,其大部分成分已為人所知,但還有一部分仍不清楚,而且血清的組成及含量通常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而存在差異。牛血清主要成分有以下幾類:
1、蛋白質(zhì)類包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進(jìn)細(xì)胞附著)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(能結(jié)合鐵離子,減少其毒性和被細(xì)胞利用)、纖維粘連素(促進(jìn)細(xì)胞附著生長)等;
2、多肽類主要是一些促進(jìn)細(xì)胞生長和分裂的生長因子,zui主要的生長因子是血小板生長因子,還有成纖維細(xì)胞生長因子、表皮細(xì)胞生長因子、神經(jīng)細(xì)胞生長因子等,雖然在血清中含量很少,但對細(xì)胞的生長和分裂也起著重要作用;
3、激素類激素對細(xì)胞的作用是多方面的。包括:
胰島素:促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細(xì)胞分裂有關(guān);
類胰島素生長因子:能與細(xì)胞表達(dá)的胰島素受體結(jié)合,從而有胰島素同樣的作用:
促生長激素:促進(jìn)細(xì)胞增殖的效應(yīng);
氫化可的松:血清中含有微量該成分,它可能具有促細(xì)胞貼附和增殖作用。但有人證明,血清中的氫化可的松,在細(xì)胞密度較高時(shí)可能有抑制細(xì)胞生長和誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生分化的作用。/
4、其他成分如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。在合成培養(yǎng)基中這些成分的作用并不明顯,與蛋白相結(jié)合的微量元素對細(xì)胞生長起促進(jìn)作用。0
二、牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)基中的主要功能
牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,具有極為重要的功能。
1、提供能促使細(xì)胞指數(shù)生長的激素、基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或含量微小的營養(yǎng)物,以及某些低分子營養(yǎng)物質(zhì);
2、提供結(jié)合蛋白,識(shí)別維生素、脂類、金屬離子,并與有毒金屬和熱源物質(zhì)結(jié)合,起解毒作用;
3、是細(xì)胞貼壁、鋪展生長所需因子的來源;
4、起酸堿度緩沖液作用;
提供蛋白酶抑制劑,細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受損傷。