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尋求反義分子
2010-4-21
1731
合理的設(shè)計(jì)和特異性使反義分子抓住了人們的想象力。不過(guò),它們比zui初預(yù)測(cè)的難生產(chǎn)得多,至今尚無(wú)任何證據(jù)表明它們具有去除單一基因的功能,而且,還存在許多未預(yù)測(cè)的非反義效應(yīng)。本文旨在綜述反義策略中產(chǎn)生或破壞特異性的一些因素,討論通過(guò)不同的標(biāo)準(zhǔn)判斷治療的復(fù)雜性及研究制劑的必要性。反義分子是指與細(xì)胞內(nèi)DNA或RNA序列相互補(bǔ)形成雜交體而阻斷或減弱其轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程的DNA或RNA片段。目前研究zui多的反義分子主要有反義寡核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODNs)和...
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兔(Rabbit)腫瘤壞死因子a(TNF-a)ELISA 檢測(cè)試劑盒
2010-4-19
2212
兔TNF-αELISA試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、緩沖液中細(xì)胞上清液及各種體液中的TNF-α。本試劑盒可以檢測(cè)天然和重組的TNF-α。本試劑盒于科研、而非用于臨床診斷。試驗(yàn)原理:兔TNF-α試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知TNF-α濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將TNF-α和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生...
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人—山羊異質(zhì)胚胎構(gòu)建及胚胎干細(xì)胞的分離培養(yǎng)
2010-4-16
1832
人胚胎干細(xì)胞(hESCs)有分化為機(jī)體各種細(xì)胞的潛能,是再生醫(yī)學(xué)、藥物篩選及發(fā)育研究的一個(gè)重要來(lái)源。hESCs是從人胚胎細(xì)胞分離培養(yǎng)而來(lái)的,然而,人胚胎來(lái)源不足嚴(yán)重限制了hESCs的研究。以動(dòng)物卵母細(xì)胞為受體、人體細(xì)胞為供體細(xì)胞的異質(zhì)核移植技術(shù)為hESCs的研究提供了新的途徑,本文嘗試了用山羊卵母細(xì)胞為受體、人包皮成纖維細(xì)胞(HFFs)為供體構(gòu)建人-山羊異質(zhì)核移植(human-goatinterspeciesnucleartransfer,hgiNT)胚胎,并分離hESCs,...
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細(xì)胞培養(yǎng)用液的配制與消毒
2010-4-14
2947
一、器材與試劑:干粉型培養(yǎng)基、胰蛋白酶,青霉素、鏈霉素.純凈水系統(tǒng)、電子天平、PH計(jì)、磁力攪拌器。具體步驟:(1)水的制備:細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水.(2)PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):1.溶解定容:將藥品(NaCl8.0g,KCl0.2g,Na2HPO4·H2O1.56g,KH2PO40.2g)倒入盛有雙蒸水的燒杯中,玻璃棒攪動(dòng),充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)...
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細(xì)胞培養(yǎng)的污染類(lèi)型
2010-4-9
1615
污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵。預(yù)防和避免污染是細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵之一。一開(kāi)始就要十分重視,應(yīng)積極采取措施,防止污染,否則會(huì)前功盡棄,不僅浪費(fèi)時(shí)間,而且浪費(fèi)人力、物力,甚至造成無(wú)法彌補(bǔ)的損失。*節(jié)污染的類(lèi)型細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的污染不僅僅指微生物,而且還包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的、對(duì)細(xì)胞生存有害或造成細(xì)胞不純的物質(zhì),包括生物和化學(xué)物質(zhì)。一、細(xì)菌污染細(xì)菌污染是實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的污染,即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素(一般為預(yù)防劑量),也可能因?yàn)椴僮鞑簧鞫鹞廴?。zui常見(jiàn)的有革蘭氏陽(yáng)性菌,如...
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分子信標(biāo)的發(fā)展
2010-4-8
2159
分子信標(biāo)是一種設(shè)計(jì)巧妙的熒光探針。在長(zhǎng)度為15-30mer寡核昔酸探針的兩端分別加上5-8mer序列互補(bǔ)的莖桿區(qū)。在自由狀態(tài)時(shí)由于莖桿區(qū)互補(bǔ)序列的結(jié)合使探針?lè)肿有纬砂l(fā)夾狀結(jié)構(gòu),所以又被稱(chēng)為發(fā)夾探針。探針的5'端及3'端分別聯(lián)用熒光素分子及碎滅劑分子。為經(jīng)典的分子信標(biāo)結(jié)構(gòu),其中1-氨基蔡-8-叛酸(EDANS)為熒光素,二甲氨基偶氮苯甲酚(DABSYI.)為猝滅劑。自由狀態(tài)時(shí),發(fā)夾結(jié)構(gòu)的兩個(gè)末端靠近,使熒光分子與碎滅分子靠近(約為7-1Onm)。此時(shí)發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移,使熒光...